20世紀(jì)80年代，一群比利時(shí)的學(xué)者正在研究水?；杷Y，項(xiàng)目研究時(shí)，一位曾在研究組學(xué)習(xí)的學(xué)生表示可以分析駱駝的血液。該項(xiàng)目的負(fù)責(zé)人，來(lái)自布魯塞爾自由大學(xué)（Vrije Universiteit Brussel）的 Serge Muyldermans同意了這個(gè)請(qǐng)求，并在不久之后讓學(xué)生在錐蟲(chóng)病實(shí)驗(yàn)課程中對(duì)血液樣本中的抗體進(jìn)行分離。因?yàn)閾?dān)心感染，學(xué)生最后用了冰箱剩余的駱駝血液實(shí)驗(yàn)。然而學(xué)生們?cè)趯?duì)駱駝血液樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，結(jié)果卻總不符合預(yù)期：只能得到抗體重鏈的分子，而輕鏈部分卻不知所蹤。這個(gè)結(jié)果說(shuō)明要么學(xué)生們的操作有錯(cuò)誤，要么來(lái)自駱駝血液中的抗體不同尋常。此后，Muyldermans團(tuán)隊(duì)花了很長(zhǎng)時(shí)間來(lái)證實(shí)駱駝的免疫系統(tǒng)確實(shí)能夠產(chǎn)生這種沒(méi)有輕鏈的天然抗體，并在1993年的《自然》雜志上報(bào)導(dǎo)了這一驚人發(fā)現(xiàn)，納米抗體得以首次亮相世界抗體舞臺(tái)。

納米抗體的獲得主要通過(guò)免疫羊駝?dòng)裳蝰勼w內(nèi)自身的抗體成熟階段來(lái)得到抗體基因，然后通過(guò)噬菌體展示篩選技術(shù)來(lái)從羊駝抗體庫(kù)中篩選得到最適合的抗體序列。整個(gè)流程主要包括羊駝免疫、噬菌體文庫(kù)構(gòu)建和抗體篩選三個(gè)階段。

羊駝免疫：每只羊駝可以同時(shí)免疫1-5個(gè)抗原，每次免疫總的抗原量保持在1-2mg之間，體積在2mL以下，將抗原和佐劑1：1乳化使其形成均勻混合物，4°保存，共進(jìn)行四輪免疫。

噬菌體文庫(kù)構(gòu)建：抽提羊駝淋巴細(xì)胞中RNA并反轉(zhuǎn)成cDNA文庫(kù)，利用特殊設(shè)計(jì)的引物在cDNA文庫(kù)中再次進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到特異的基因片段。隨后將特異的基因片段拼接重組在噬菌體載體上，并轉(zhuǎn)染大腸桿菌，最終完成納米抗體基因文庫(kù)的構(gòu)建。

抗體篩選：將靶點(diǎn)抗原或者帶有抗原的物質(zhì)直接/間接的固定在固體載體上，隨后加入噬菌體文庫(kù)和抗原相互作用。作用一段時(shí)間后陽(yáng)性噬菌體會(huì)和抗原結(jié)合，用洗滌液洗滌固體載體表面，可以將未結(jié)合或非特異結(jié)合的噬菌體洗去。隨后用強(qiáng)酸或者強(qiáng)堿破壞固體載體上抗原和陽(yáng)性噬菌體的結(jié)合，從而得到陽(yáng)性噬菌體溶液。一般重復(fù)進(jìn)行2-3輪的篩選即可獲得符合開(kāi)發(fā)要求的納米抗體克隆。

納米抗體具有分子量小、特異性高等特點(diǎn)。自發(fā)現(xiàn)以來(lái)，重組VHH已作為科研的基礎(chǔ)工具，目前廣泛應(yīng)用于腫瘤學(xué)，感染和免疫等醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。2018年歐盟批準(zhǔn)全球首款用于治療成年獲得性血栓性血小板減少性紫癜的納米抗體藥物—Caplacizumab。2021年康寧杰瑞制藥，思路迪醫(yī)藥和先聲藥業(yè)合作開(kāi)發(fā)的PD-L1抗體-恩維達(dá)在中國(guó)上市，是國(guó)內(nèi)第一個(gè)獲批上市的納米抗體藥物。2022年獲批上市的抗體藥物中，日本的ozoralizumab是首次獲批的納米雙特異抗體，靶向TNFα/HAS(2+1結(jié)構(gòu))。 

主要應(yīng)用：

更多同系熱賣產(chǎn)品